PENAPISAN ISOLAT KAPANG ENDOFIT LIPOLITIK UNTUK PRODUKSI LIPASE PADA AMPAS KELAPA (Screening of Lipolitic Endophyte Isolates for Lipase Production on Coconut Dregs)
Abstract
Endophytic fungi are microbes that live in plant tissues. This research aimed to select endophytic fungi isolates that have lipolytic function for lipase production using coconut dregs medium. Twenty endophytic fungi isolates were selected to obtain lipolytic fungi. Three potential lipolytic fungi were used to ferment coconut dregs (with and without the addition of minerals) as an internal medium to produce lipase. The highest lipase was precipitated using ammonium sulfate at 80% saturation while TLC was carried out on the filtrate. Six endophytic fungi isolates were showed to have lipolytic activtiy (i.e. producing clear zones) during screening. Three isolates with highest clear zones were HL.104F.467, JB.79F.374, and R.6F.18; with lipase activity 128.39 μmol/mL, 123.83 mol/mL and 55.46 μmol/mL respectively. Crude lipase precipitation from isolate R.6F.18 showed 2.3 times greater activity while the others were not significantly different. TLC results indicated presence of galactose in crude enzymes (JB.79F.374 and R.6F.18) and compound or sugar outside standard.
Keywords: coconut dreg, endophytic mold, lipase, TLC.
ABSTRAK
Kapang endofit merupakan mikroba yang hidup di dalam jaringan tanaman. Kapang jenis ini terus digali pemanfaatannya untuk berbagai keperluan. Tujuan penelitian ini adalah menyeleksi kapang endofit yang bersifat lipolitik untuk digunakan dalam memproduksi enzim lipase pada medium ampas kelapa. Dua puluh isolat kapang endofit diseleksi pada medium selektif (media PDA yang mengandung 0,1% bromocresolgreen dan Tween 80) untuk mendapatkan kapang lipolitik. Selanjutnya, tiga isolat kapang lipolitik potensial hasil seleksi digunakan untuk memfermentasi ampas kelapa sehingga menghasilkan enzim lipase. Tahap fermentasi ini menggunakan dua perlakuan, yakni dengan penambahan mineral dan tanpa penambahan mineral. Enzim lipase tertinggi yang diperoleh selanjutnya diendapkan menggunakan ammonium sulfat pada 80% saturasi. TLC dilakukan terhadap filtrat (crude enzyme) untuk mengetahui jenis gula yang dihasilkan. Hasil penapisan menunjukkan bahwa dari dua puluh isolat terdapat enam isolat kapang endofit yang bersifat lipolitik (membentuk zona bening). Tiga isolat memberikan zona bening yang cukup luas (HL.104F.467; JB.79F.374 ; R.6F.18); dengan aktivitas lipase tertinggi masing-masing adalah 128,39 μmol/mL, 123,83 mol/mL dan 55,46 μmol/mL (lama inkubasi 96 jam). Pengendapan crude enzyme lipase dari isolat R.6F.18 menghasikan aktivitas 2,3 kali lebih besar, sedangkan dua isolat lainnya tidak berbeda nyata. Hasil TLC menunjukkan adanya galaktosa dalam crude enzyme (JB.79F.374 dan R.6F.18) dan senyawa atau gula lain diluar standar.
Kata kunci: ampas kelapa, kapang endofit, lipase, TLC
Keywords
Full Text:
PDFReferences
Adio, O. Q., Sarafdeen. O, K., Michael. B. O.,& Adebukola. M. O. (2015). Production of lipases in solid-state fermentation by aspergillus niger F7-02 with agricultural residues. J Microbiol Biotech Food Sci. 4 (6), 509-512.
Aulia, A. (2014). Penapisan dan pemanfaatan kapang endofit dalam pembuatan bioetanol dari limbah pengolahan agar agar. Tesis. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Azizah, N. N. (2008). Isolasi dan identifikasi jamur endofit dari daun jambu biji (psidium guajava l.) penghasil antibakteri terhadap bakteri escherichia coli dan staphylococcus aureus. Skripsi. Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Balaji, V., & Ebenezer, P. (2008). Optimization of extracellular lipase production in Colletotrichum gloeosporioides by solid state fermentation. Indian Journal of Science and Technology. 1,1-8.
Clausen, K., Christensen, M.W., Budolfsen, G., Spendler, T., Deussesn, H.J,
Svendsen, A., Borch, K., Patkar, S.A. (2000). Lipolytic enzymes in industrial applications. Biochem. 42,35-47.
Dinas Perkebunan Propinsi Sumatera Barat. (2008). Statistik Dinas Perkebunan Propinsi Sumatera Barat. Padang: Dinas Perkebunan Propinsi Sumatera Barat.
Hanson, R. S, & Philips, J. A. (1981). Manual of methods for general bacteriology. American Society for Microbiol. pp. 359-360.
Iftikhar, T., Mubashir,. N.., Muhammad, A. Z., Ikram.U. H. (2010). Production of extracellular lipases by rhizopus oligosporus in a stirred fermentor. Brazilian Journal of Microbiology. 1124-1132.
Iftikhar, T., Mubashir, N., Rukhsana, J.,& Ikram, U. H. (2011). Purification And Characterization Of Extracellular Lipases. Pak. J. Bot., 43(3), 1541-1545.
Indah., Mappiratu.,Musafira. (2017). Produksi enzim lipase dari Aspergillus niger isolat kapang kopra dengan menggunakan medium kelapa parut. Jurnal Riset Kimia. Kovalen 3(3), 269-276.
Jaeger, K.E., Steinbuchel, A., Jendrossek, D. (1995). Substrate specificities of bacterial polyhydroxyalkanoate depolymerases and lipases: bacterial lipases hydrolyze poly-(5-Hydroxyalkanoates). Applied and Environmental Microbiology. 61,3113-3118.
Kaewthong, W., Sirisansaneeyakul, S., Prasertsan, P., & Aran, H. (2005). Continuous production of monoacylglycerols by glycerolysis of palm olein with immobilized lipase. Process Biochemistry, 40(5), 1525-1530.
Kurniawan, H., R. Utomo & L.M. Yusiati. (2016). Kualitas nutrisi ampas kelapa (Cocos nucifera L.) fermentasi menggunakan Aspergillus niger.Buletin Peternakan Vol. 40 (1), 26-33.
Kurnia, D. R. D. (2010). Studi aktivitas enzim lipase dari Aspergillus niger sebagai biokatalis pada proses gliserolisis untuk menghasilkan monoasilgliserol. Tesis. Universitas Diponegoro, Semarang.
Lehninger, A.L. (1982). Dasar-dasar biokimia Jilid 1. Jakarta:Erlangga.
Liu, Y. & Jonathan, Y. C. (2016). Enzyme immobilization on cellulose matrixes. Journal of Bioactive and Compatible Polymers.1–15.
Lukose, R. Ml. (2013). The chemical composition of tender coconut (cocos nucifera l.) water and coconut meat and their biological effect in human body. International Journal of Green and Herbal Chemistry. 2 (3), 723-729.
Madigan M.T., Martinko J.M., Stahl D.A., Clark D.P. (2011). Biology of microorganism. 13th ed. San Francisco: Bunjamin Cumming.
Maehara, S., Simanjuntak, P., Kitamura, C., Ohashik., & Shibuya, H. (2011). Cinchona alkaloids are also produced by an endophytic filamentous fungus living in cinchona plant. Chem Pharm Bull. 59(8), 1073-1074.
Marquez, P.O. (1999). Nutritional advantages of Philipine coconut flour. Coconut Farmers Buletin. 4,1-7.
Matthews, H.R., Freedland, R.A., & Miesfeed, R.L. (1997). Biochemistry a short course. Chichester: John Wiley & Son, INC.
Melliawati, R dan Nuryati. (2018). Seleksi limbah pertanian untuk produksi enzim amylase oleh Neurospora crassa InaCC 226. Prosiding Seminar Nasional Biologi (SEMABIO). Biodiversitas : Penelitian, Pembelajaran dan Penerapannya dalam Pengelolaan Lingkungan. (pp. 440-447). Bandung: Universitas Islam Negeri Sunan Gunung Djati.
Melliawati, R., Suherman,R.S. & Bambang,. S. 2006. Pengkajian kapang endofit dari taman nasional gunung halimun sebagai penghasil glukoamilase. Berkala Penelitian Hayati (Journal of Biological Researches) 12(1), 19-25.
Meri, Y., Widya, E., Tarsono, T., M. Alfian R. (2015). Pemanfatan ampas kelapa sebagai bahan baku tepung kelapa tinggi serat dengan metode freeze drying. Jurnal Integrasi Proses. Vol 5(2),101-107.
Nelson, N.(1941). A photometric adaption of the somogi method for the determination of glucose. Jurnal Biol. Chem. 153(2), 375-379
Patrik, M. P. (2018). Pemanfaatan ampas kelapa (cocos nucifera) untuk pembuatan biodiesel. Buletin Palma. 35(2008). Diambil dari http://ejurnal.litbang.pertanian.go.id/index.php/palma/article/view/8321.
Pelczar M. J. & Chan, Jr., E. C. S. (1981). Elements of microbiology [Dasar-Dasar mikrobiologi jilid I]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Puri, E. (2011). Pengaruh penambahan ampas kelapa hasil fermentasi aspergillus oryzae dalam pakan komersil terhadap pertumbuhan ikan nila (Oriochromius niloticus). Skripsi. Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Putri, M. F. (2010). Tepung ampas kelapa pada umur panen 11-12 bulan
sebagai bahan pangan sumber kesehatan. Jurnal Kompetensi Teknik 1, 97- 105.
Simanjuntak, P., Bustanussalam, Prana, T. K., Ohashi, K., & Shibuya, H. (2002). Production Of Quinine Alkaloid By Some Endophytic Microbes With Addition Of Inducer Substances [Studies on Endophytic Microbes of Cinchona sp. plants (2)]. Majalah Farmasi Indonesia,13(1), 1-6.
Sudha, V., Ramar. G., Kathirvelu, B., Naif, A. A; Veeramuthu, D. (2016). Biological properties of Endophytic Fungi. Braz. arch. biol. technol. 59,1-7.
Sukara. E. (1987). Production of single cell protein from cassava by microfungi. Thesis. University of Queensland, Queensland.
Sharma, R., Chisti, Y., Banerjee, C.U. (2001). Production, purification,characterization and applications of lipases. Biotechnol. Advan. 19, 627-662.
Treichel, H., Debora, de. O., Marcio.A. M., Marco Di. L., Oliveira, J.V. (2010). A. Review on microbial lipases production. Food Bioprocess Technol. 3,182-196
Vecchia, R. D., Damianni, S., Maria,da.G. & Valdir.S. (2005) Carboxymethylcellulose and poly (vinyl alcohol) used as a film support for lipases immobilization. Process Biochemistry. 2677–2682.
Winarno, E. K. (2006). Produksi alkaloid oleh mikroba endofit yang diisolasi dari batang kina Cinchona ledgeriana Moens dan Cinchona Pubescens Vahl (Rubiaceae). Jurnal Kimia Indonesia. 1(2), 59-66.
Winarno, F.G., Srikandi F., Dedi F. (1980). Pengantar teknologi pangan. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama.
Winarno, F. G. (1984). Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.
DOI: http://dx.doi.org/10.36974/jbi.v9i2.3954
Refbacks
- There are currently no refbacks.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.
BIOPROPAL Industri
Published by :
Institute for Industrial Research and Standardization (Baristand Industri) in Pontianak
Agency for Industrial Research and Development, Ministry of Industry
Jl. Budi Utomo No. 41 Pontianak, West Kalimantan, Indonesia
Tel / Fax : +62 561 881393, 881533
email : biopropal.industri@gmail.com
BIOPROPAL Industri indexed in:
